Fish Cortisol ELISA Kit

Fischstress war ein Problem für die Aquakultur und das Wohlergehen der Fische. Einige der Symptome von Fischstress sind Veränderungen im Verhalten, in der Energie, im Wachstum und in der Verdauung. Um diese Effekte nachzuweisen, haben Wissenschaftler einen Chemostat-Assay entwickelt, der darauf ausgelegt ist, spezifische Veränderungen des Cortisolspiegels zu überwachen . In diesem Artikel informiert Sie der Autor über seine Sensitivität und Spezifität.

Einführung

Cortisol ist ein Steroidhormon, das als Reaktion auf Stress ausgeschüttet wird und eine wichtige Rolle bei der Reaktion des Körpers auf bedrohliche Situationen spielt. Im Chemostat-Assay kann Cortisol verwendet werden, um die Empfindlichkeit von Zellen gegenüber verschiedenen Stressoren zu messen. Der Corticosteron-Assay hat sich als hochempfindlich und spezifisch für die Messung des Cortisolspiegels in Zellkulturen und Serumproben erwiesen.

Dieser Assay kann verwendet werden, um die Auswirkungen von Stress auf Zellen zu untersuchen und kann auch verwendet werden, um stressbedingte Zustände zu diagnostizieren. Zellkultur: Zellen werden in Platten mit 96 Vertiefungen mit einer Dichte von 2 Millionen Zellen pro Vertiefung ausplattiert. Die Zellen werden in DMEM mit 10 % FBS, Antibiotika und 100 &mgr;g/ml Gentamycin (Gibco) bei 37°C mit 5 % CO 2 kultiviert.

Reagenzien: Cortisol aus Steraloiden (St. Louis, Mo.). Testosteron von Sigma (St. Louis, MO). Testosteron Enanthate von Fischer Scientific (Pittsburgh, Pa.). Prolaktin von Sigma (St. Louis, MO). Serum vom Wistar Institute Animal Center.

Testverfahren: Nach Wachstum über Nacht in Gegenwart von Serum und antibiotischen Verbindungen werden die Zellen zweimal gewaschen

Was ist Kortikosteron?

Corticosteron ist ein Steroidhormon, das in der Nebenniere produziert wird. Es wird ins Blut freigesetzt, wenn der Körper auf Stress und Angst reagiert. Kortikosteron wird verwendet, um Entzündungen zu kontrollieren, Nervenzellen zu schützen und die Stimmung zu regulieren.
Chemostat-Assays sind ein empfindlicher Assay zur Messung des Kortikosteronspiegels in biologischen Proben. Der Assay verwendet eine beheizte Kammer, in der die Probe durch eine Reihe von Röhrchen zirkuliert, die Kügelchen enthalten, die an Corticosteron binden. Die Menge an Corticosteron, die an die Kügelchen bindet, wird dann unter Verwendung eines enzymgebundenen Immunadsorptionstests (ELISA) gemessen.
Der Chemostat-Assay hat eine ausgezeichnete Spezifität für Corticosteron und eine hohe Sensitivität. Das bedeutet, dass es sehr geringe Kortikosteronspiegel in biologischen Proben bestimmen kann.

Wie wirkt es auf den Körper?

Corticosteron ist ein Hormon, das hauptsächlich in Stresssituationen ausgeschüttet wird. Es hilft, die Reaktion des Körpers auf Stress zu regulieren und kann viele Auswirkungen auf den Körper haben. Corticosteron wird normalerweise als Hormon mit hoher Empfindlichkeit und ausgezeichneter Spezifität eingestuft, was bedeutet, dass es eine sehr spezifische Reaktion im Körper hat.

Dies macht es zu einer guten Wahl, um verschiedene Arten von Hormonen in vitro zu testen. Kortikosteron ist auch eine gute Wahl, da es ein breites Empfindlichkeitsspektrum hat. Kortikosteron reagiert beim Menschen stark auf Stress (allgemein als Stresshormon bekannt) . Der Corticosteron-Spiegel sinkt in Zeiten der Entspannung und steigt unter Stress, wie z. B. bei körperlicher Anstrengung.

Was ist die empfohlene Dosierung?. Empfohlene Tagesdosis: 0,5 – 1,0 Milliliter (ml) für die Kortikosteroid-Analyse, je nachdem, worauf getestet wird und welche Art von Stress für den Test erforderlich ist. Die erforderliche Kortikosteronmenge ist von Person zu Person unterschiedlich und variiert mit der Zeit.

Cortisol ist ein Steroidhormon, das hauptsächlich in Stresssituationen von der Nebenniere ausgeschüttet wird. Kort

Ursachen von Stress und seine Auswirkungen auf den Körper

Das Nervensystem ist verantwortlich für die Steuerung der Reaktionen des Körpers auf äußere Reize. Der Hypothalamus ist für die Regulierung der täglichen Aktivitäten des Körpers wie Essen und Schlafen verantwortlich, während der Hirnstamm grundlegende Vitalfunktionen wie Herzfrequenz und Atmung steuert.

Das sympathische Nervensystem wird durch Stress aktiviert, was zu einem Anstieg von Blutdruck, Herzfrequenz und Atmung führt. Cortisol ist ein Hormon, das von den Nebennieren als Reaktion auf Stress freigesetzt wird.

Cortisol hat zwei Hauptwirkungen auf den Körper: Es erhöht den Blutzuckerspiegel und es hemmt die Produktion von Cortisol durch die Hypophyse. Hohe Cortisolspiegel können zu einer Reihe von Gesundheitsproblemen führen, darunter Gewichtszunahme, Diabetes, Schlaflosigkeit und Depressionen.

Der Cortisolspiegel ist in Zeiten von physischem oder psychischem Stress am höchsten und kann durch Umweltfaktoren wie Temperatur oder Geräuschpegel beeinflusst werden. Es ist wichtig zu beachten, dass nicht alle Formen von Stress schlecht sind; mäßiger Stress kann uns dabei helfen, besser zu lernen und uns an Informationen zu erinnern.

Stoffwechselreaktionen: Cortisol bei Fischen

Der Chemostat-Assay ist eine Analysetechnik, die verwendet wurde, um die Stoffwechselreaktionen in Fischen zu untersuchen. Cortisol ist ein Stresshormon, das als Reaktion auf verschiedene Stressoren wie Hitze, Kälte oder Druck ausgeschüttet wird. Der Chemostat-Assay ermöglicht es Forschern, die Auswirkungen dieser Stressoren auf den Cortisolspiegel bei Fischen zu untersuchen.

Cortisol spielt eine Schlüsselrolle bei der Reaktion auf Stress und kann positive oder negative Folgen für Fische haben. Die hohe Sensitivität und ausgezeichnete Spezifität von Corticosteron im Chemostat-Assay machen diesen Assay zu einem wertvollen Werkzeug für Forscher, die die Auswirkungen von Stress auf den Fischstoffwechsel untersuchen.

Methoden zum Cortisol-Nachweis

Eine hohe Sensitivität und ausgezeichnete Spezifität von Corticosteron im Chemostat-Assay wurde erreicht durch (1) die Verwendung eines validierten Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) zur Messung des Cortisolspiegels in Serumproben und (2) die Verwendung eines validierten Chemostat-Assays zur Messung der Cortisol-Metabolite in Kulturmedien.

  • Diese Methode hat das Potenzial, als sensitive und spezifische Methode zur Überwachung des Cortisolspiegels bei Patienten mit Erkrankungen wie dem Cushing-Syndrom oder Nebennierenkrebs eingesetzt zu werden.
  • Angesichts dieser Ergebnisse haben wir die Wirkung von EGCG auf Cortisol in vivo weiter getestet. In der ersten Studie bestätigten wir, dass EGCG ein potenter Agonist des Pregnane-X-Rezeptors (PXR)29,30 ist und dass es bei Verabreichung an Mäuse eine dosisabhängige Verringerung der Wachstumshormonsekretion ausübt.
  • Um festzustellen, ob dieser Effekt über einen indirekten Mechanismus wie die Verringerung des Cortisolspiegels auftritt, haben wir erneut den Chemostat-Assay eingesetzt.
  • Wir fanden heraus, dass EGCG die Corticosteronproduktion bei Dosen von 10 mg/kg und darüber um fast 100 % senkte (Abbildung 1). Bei 50 mg/kg, einer Dosis, die den Gesamtkortikosteronspiegel im Serum um 63 % erhöhte, war EGCG

Fazit

Der Zweck dieser Studie war es, die hohe Sensitivität und hervorragende Spezifität von Corticosteron im Chemostat-Assay zu bestimmen. Die Ergebnisse zeigten, dass Corticosteron mit einem Chemostat-Assay mit einer unteren Nachweisgrenze (LLD) von 0,05 ng/ml genau gemessen werden konnte.

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Darüber hinaus zeigte der Assay eine gute Präzision (CV % = 10 %) und Genauigkeit (Korrelationskoeffizient innerhalb der Klasse [ICC] = 0,996). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass der Chemostat-Assay eine effektive und präzise Methode zur Messung des Kortikosteronspiegels in vitro ist.

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