Phosphothreonin-Antikörper (Biotin)

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCRs)1 sind die größte Familie von zellulären Oberflächenrezeptoren, die Mediatoren zahlreicher physiologischer Reaktionen und die Ziele von 50 % des Therapeutikums
Drogen (1). Ihre Aktivierung erfolgt durch die Bindung spezifischer Liganden an die extrazelluläre Seite des Rezeptors, während die zelluläre Aktivierung durch Wechselwirkungen mit zytoplasmatischen Proteinen wie G-Proteinen vermittelt wird.

Nach der ligandenvermittelten Aktivierung sind GPCRs das Ziel regulatorischer Mechanismen, die zunächst darauf abzielen,die Signalisierungskapazität der Zelle zu beenden und dann wieder zu initiieren.

Darüber hinaus wurde auch gezeigt, dass die GPCR-Prozessierung bei der Aktivierung von Src und bestimmten MAP-Kinase-Wegen wichtig ist (2). Das Protein Arrestin wurde zuerst als ein Protein charakterisiert, das an der GPCR-Desensibilisierung nach der Rezeptorphosphorylierung beteiligt ist, aber kürzlich wurde gezeigt, dass es mehrere Rollen in der Rezeptorfunktion spielt, einschließlich als Adapter für Clathrin-vermittelte Endozytose und als Gerüstprotein für Komponenten der MAP-Kinase-Kaskade ( 3). Angesichts unseres wachsenden Wissens über die vielen verschiedenen Funktionen von Arrestin ist es klar, dass ein besseres Verständnis seiner Wechselwirkungen mit GPCRs ist wesentlich.

  • Arrestine umfassen eine Familie von vier bekannten Mitgliedern in Säugetieren: zwei visuelle Arrestine, 1 und 4, die in den Stäbchen- und Zapfenzellen der Retina gefunden werden, und zwei nicht-visuelle Arrestine, 2 und 3, die in den meisten gefunden werden andere Gewebe des Körpers (4). Die 2,8-Å-Kristallstruktur von visuellem Arrestin (5) und die 1,9-Å-Kristallstruktur von Arrestin-2 (6) weisen beide darauf hin, dass Arrestin als zweiteiliges Molekül vorliegt, das aus zwei siebensträngigen Sandwiches mit einem Netzwerk aus wasserstoffgebundenen Ladungen besteht Reste, die das bilden, was als polarer Kern (5) beschrieben wurde.
  • Das aktuelle Modell von Arrestin-vermittelten Wechselwirkungen mit Liganden-besetzten GPCRs besagt, dass nach Ligandenbesetzung zytoplasmatische Regionen des Rezeptors an Serin- und Threoninresten durch ein Mitglied der Familie der G-Protein-gekoppelten Rezeptorkinasen phosphoryliert werden (7).
  • Bei der Bindung von Arrestin zerstören diese phosphorylierten Reste den polaren Kern von Arrestin und induzieren eine Konformationsänderung innerhalb des Moleküls, die es ihm ermöglicht, weiter mit dem Rezeptor zu interagieren (8).
  • Dieses Modell schlägt vor, dass die Bindung von Arrestin an den Rezeptor weitere Rezeptorinteraktionen blockiertmit G-Proteinen, vermutlich durch sterische Hemmung, wodurch eine weitere G-Protein-vermittelte zelluläre Aktivierung verhindert wird (9).

Jüngste Studien haben gezeigt, dass Arrestine eine andere Rolle bei der Rezeptorsignalisierung als der Desensibilisierung spielen. Es wurde gezeigt, dass Arrestin als Adapterprotein wirkt, das sowohl mit dem Clathrin-Adapter AP-2 als auch mit Clathrin selbst interagiert, was zur Internalisierung einiger Arrestin-gebundener Rezeptoren über Clathrin-beschichtete Pits führt (10, 11).

Es wurde auch vorgeschlagen, dass Arrestin die Rate der Resensibilisierung und Reexpression von Rezeptoren basierend auf der Rate seiner Dissoziation vom internalisierten Rezeptor bestimmt (12, 13). Eine der neueren Beobachtungen von Arrestin war jedoch die Entdeckung, dass Arrestine als Gerüstproteine ​​in einigen MAP-Kinase-Kaskaden fungieren, insbesondere in Kaskaden, die zur JNK3- und ERK2-Aktivierung führen (14–17). Diese Studien haben die Rolle von Arrestin im Rezeptor erhöht Signalübertragung von einem desensibilisierenden Mittel zu einem aktiven und vielseitigen Teilnehmer an der Signaltransduktion.
Trotz der Bedeutung von Arrestin-GPCR-Wechselwirkungen ist wenig über die Rezeptordomänen und Mechanismen bekannt, die an der Arrestinbindung beteiligt sind. Mutageneseexperimente haben Arrestinregionen definiert, die an der Erkennung des Phosphorylierungsstatus sowie des Aktivierungsstatus (d. h. ob ein Ligand gebunden ist oder nicht) des Rezeptors beteiligt sind (6, 8, 18, 19). Der Austausch von Carboxyl-terminalen Domänen zwischen GPCRs hat auch gezeigt, dass das Muster der Rezeptor-Phosphorylierung in dieser Domäne die Raten der Rezeptor-Internalisierung und -Recycling/Resensibilisierung beeinflussen kann (13). Wir haben die Mechanismen der Rezeptoraktivierung, Desensibilisierung und Internalisierung unter Verwendung des Nformyl-Peptid-Rezeptors (FPR), eines Mitglieds der Rezeptorfamilie der Chemolockstoffe/Chemokine, untersucht (20, 21). Unsere Ergebnisse haben gezeigt, dass die Rezeptorphosphorylierung entscheidend für die Arrestinbindung ist (22, 23), ebenso wie das Vorhandensein des hochkonservierten „DRY“-Motivs (24). Arrestin-Wechselwirkungen mit dem FPR sind jedoch für die FPR-Internalisierung oder die Verhinderung der G-Protein-Bindung nicht erforderlich, da wir kürzlich gezeigt haben, dass die Rezeptorphosphorylierung allein ausreichen kann, um G-Protein-Wechselwirkungen in Abwesenheit von Arrestin zu blockieren (22, 23). Diese Ergebnisse legen nahe, dass die primäre Rolle von Arrestin in bestimmten GPCR-Systemen tatsächlich darin bestehen könnte, als Adapter und Gerüst zu fungieren.
In dieser Studie untersuchten wir die Wechselwirkungen zwischen Mitgliedern der Arrestin-Familie mit der phosphorylierten carboxylterminalen Domäne des FPR unter Verwendung eines Bead-basierten, zellfreien Assays. Es wurden biotinylierte Peptide synthetisiert, die die 47 Reste des FPR-Carboxylterminus sowohl phosphoryliert als auch unphosphoryliert darstellen Zustand und an Streptavidin-beschichtete Polystyrolkügelchen gebunden, die dann mit Fluorescein-konjugierten Arrestinen inkubiert und durch Durchflusszytometrie analysiert wurden, um die Arrestinbindung zu bestimmen. Wir fanden heraus, dass Arrestine Carboxyl-terminale Peptide in einer phosphorylierungsabhängigen Weise banden.
Verkürzte Arrestine, die normalerweise intakte Rezeptoren in a binden phosphorylierungsunabhängig, auch nur phosphorylierte Peptide an Beads gebunden.

Phosphothreonine antibody (biotin)

60R-PR002bt Fitzgerald 100 ug 1008 EUR

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

abx448368-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Rabbit Anti Phosphothreonine Polyclonal Antibody,Biotin

DPBT-68215RP Creative Diagnostics 50 µg 1057.2 EUR

Phosphothreonine antibody

20C-CR1334RP Fitzgerald 100 ug 159.6 EUR

Phosphothreonine Antibody

abx448440-400ul Abbexa 400 ul 644.4 EUR

Phosphothreonine antibody

70R-PR006 Fitzgerald 100 ug 159.6 EUR

ACE2 Antibody (biotin)

3217-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 229.7 EUR

ACE2 Antibody (biotin)

3217-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 594.26 EUR

CX3CR1 Antibody (biotin)

2093-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 206.18 EUR

CX3CR1 Antibody (biotin)

2093-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 523.7 EUR

Phosphothreonine-Pro antibody

20R-PR017 Fitzgerald 100 ug 159.6 EUR

Phosphothreonine Antibody (APC)

abx448360-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (FITC)

abx448374-400ul Abbexa 400 ul 693.6 EUR

Phosphothreonine Antibody (PerCP)

abx448394-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (RPE)

abx448402-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (Streptavidin)

abx448410-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (HRP)

abx448441-400ul Abbexa 400 ul 727.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-152F Stressmarq 0.4ml 501.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F Stressmarq 0.4ml 434.4 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A390 Stressmarq 0.4ml 490.8 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A488 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A565 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A594 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A633 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A655 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A680 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A700 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-ALP Stressmarq 0.4ml 483.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-APC Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-APCCY7 Stressmarq 0.4ml 576 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-BI Stressmarq 0.4ml 486 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY350 Stressmarq 0.4ml 507.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY405 Stressmarq 0.4ml 493.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY488 Stressmarq 0.4ml 482.4 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY594 Stressmarq 0.4ml 484.8 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY633 Stressmarq 0.4ml 478.8 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-FITC Stressmarq 0.4ml 481.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-P594 Stressmarq 0.4ml 498 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-PCP Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-RPE Stressmarq 0.4ml 487.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-STR Stressmarq 0.4ml 488.4 EUR

PD1 Antibody [7H6] (biotin)

RF16003-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 229.7 EUR

PD1 Antibody [7H6] (biotin)

RF16003-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 594.26 EUR

PDL1 Antibody [8E12] (biotin)

RF16032-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 229.7 EUR

PDL1 Antibody [8E12] (biotin)

RF16032-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 594.26 EUR

TIGIT Antibody [10B1] (biotin)

RF16058-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 229.7 EUR

TIGIT Antibody [10B1] (biotin)

RF16058-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 594.26 EUR

TIM3 Antibody [10C10] (biotin)

RF16103-biotin-002mg ProSci 0.02 mg 229.7 EUR

TIM3 Antibody [10C10] (biotin)

RF16103-biotin-01mg ProSci 0.1 mg 594.26 EUR

Anti-human CD14 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00137-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD11b Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00144-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD19 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00154-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD38 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00193-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD25 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00214-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD4 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00344-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD5 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00480-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD45 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00555-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD2 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00570-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD71 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00591-Biotin BosterBio 100µg 294 EUR

Anti-human CD62L Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00652-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD59 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00914-Biotin BosterBio 100µg 318 EUR

Anti-human CD117 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01335-Biotin BosterBio 100μg 268.8 EUR

Anti-human CD32 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01450-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD90 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01818-Biotin BosterBio 100µg 321.6 EUR

Anti-human CD7 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01974-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD235a Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC02184-Biotin BosterBio 100µg 294 EUR

Anti-human CD8 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC02236-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-Human VEGI Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC02402-Biotin BosterBio Various Sizes 596.4 EUR

Anti-human CD3 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC02675-Biotin BosterBio 100µg 182.4 EUR

Anti-human CD20 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC03780-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD10 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC04065-Biotin BosterBio 100µg 226.8 EUR

Anti-human CD57 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC09548-Biotin BosterBio 100µg 294 EUR

Anti-human HLA-DR Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00568-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Anti-human CD55/Daf Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC00910-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Monoclonal Anti-Phosphothreonine (PY20) IgG-Biotin conjugate

PTHR12-BTN Alpha Diagnostics 100 ul 489.6 EUR

Anti-human CD33/Siglec 3 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01508-Biotin BosterBio 100µg 280.8 EUR

Anti-human CD22/Siglec 2 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated

FC01572-Biotin BosterBio 100µg 279.6 EUR

Phosphoserine and Phosphothreonine antibody

70R-10686 Fitzgerald 1 ml 447.6 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 390)

abx448288-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 488)

abx448296-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 565)

abx448304-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 594)

abx448312-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 633)

abx448320-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 655)

abx448328-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 680)

abx448336-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 700)

abx448344-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (Alkaline Phosphatase)

abx448352-400ul Abbexa 400 ul 693.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D Stressmarq 0.1ml 386.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A390 Stressmarq 0.1ml 442.8 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A488 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A565 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A594 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A633 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A655 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A680 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A700 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-ALP Stressmarq 0.1ml 434.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-APC Stressmarq 0.1ml 440.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-APCCY7 Stressmarq 0.1ml 528 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-BI Stressmarq 0.1ml 436.8 EUR

Zusätzlich Direktbindung u Kompetitionsassays zeigen, dass verkürzte Arrestine binden
das phosphorylierte carboxylterminale Peptid mit signifikant höherer Affinität als Arrestine voller Länge. Im Vergleich mit phosphorylierungsunabhängigen Varianten von Arrestin in voller Länge zeigen unsere Ergebnisse eine wichtige Rolle für die carboxyterminale Domäne von Arrestin bei der Kontrolle der Affinität von Bindungswechselwirkungen mit phosphorylierten Rezeptordomänen.

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