Phosphothreonin-Antikörper (Biotin)

G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCRs)1 sind die größte Familie von zellulären Oberflächenrezeptoren, die Mediatoren zahlreicher physiologischer Reaktionen und die Ziele von 50 % des Therapeutikums
Drogen (1). Ihre Aktivierung erfolgt durch die Bindung spezifischer Liganden an die extrazelluläre Seite des Rezeptors, während die zelluläre Aktivierung durch Wechselwirkungen mit zytoplasmatischen Proteinen wie G-Proteinen vermittelt wird.

Nach der ligandenvermittelten Aktivierung sind GPCRs das Ziel regulatorischer Mechanismen, die zunächst darauf abzielen,die Signalisierungskapazität der Zelle zu beenden und dann wieder zu initiieren.

Darüber hinaus wurde auch gezeigt, dass die GPCR-Prozessierung bei der Aktivierung von Src und bestimmten MAP-Kinase-Wegen wichtig ist (2). Das Protein Arrestin wurde zuerst als ein Protein charakterisiert, das an der GPCR-Desensibilisierung nach der Rezeptorphosphorylierung beteiligt ist, aber kürzlich wurde gezeigt, dass es mehrere Rollen in der Rezeptorfunktion spielt, einschließlich als Adapter für Clathrin-vermittelte Endozytose und als Gerüstprotein für Komponenten der MAP-Kinase-Kaskade ( 3). Angesichts unseres wachsenden Wissens über die vielen verschiedenen Funktionen von Arrestin ist es klar, dass ein besseres Verständnis seiner Wechselwirkungen mit GPCRs ist wesentlich.

  • Arrestine umfassen eine Familie von vier bekannten Mitgliedern in Säugetieren: zwei visuelle Arrestine, 1 und 4, die in den Stäbchen- und Zapfenzellen der Retina gefunden werden, und zwei nicht-visuelle Arrestine, 2 und 3, die in den meisten gefunden werden andere Gewebe des Körpers (4). Die 2,8-Å-Kristallstruktur von visuellem Arrestin (5) und die 1,9-Å-Kristallstruktur von Arrestin-2 (6) weisen beide darauf hin, dass Arrestin als zweiteiliges Molekül vorliegt, das aus zwei siebensträngigen Sandwiches mit einem Netzwerk aus wasserstoffgebundenen Ladungen besteht Reste, die das bilden, was als polarer Kern (5) beschrieben wurde.
  • Das aktuelle Modell von Arrestin-vermittelten Wechselwirkungen mit Liganden-besetzten GPCRs besagt, dass nach Ligandenbesetzung zytoplasmatische Regionen des Rezeptors an Serin- und Threoninresten durch ein Mitglied der Familie der G-Protein-gekoppelten Rezeptorkinasen phosphoryliert werden (7).
  • Bei der Bindung von Arrestin zerstören diese phosphorylierten Reste den polaren Kern von Arrestin und induzieren eine Konformationsänderung innerhalb des Moleküls, die es ihm ermöglicht, weiter mit dem Rezeptor zu interagieren (8).
  • Dieses Modell schlägt vor, dass die Bindung von Arrestin an den Rezeptor weitere Rezeptorinteraktionen blockiertmit G-Proteinen, vermutlich durch sterische Hemmung, wodurch eine weitere G-Protein-vermittelte zelluläre Aktivierung verhindert wird (9).

Jüngste Studien haben gezeigt, dass Arrestine eine andere Rolle bei der Rezeptorsignalisierung als der Desensibilisierung spielen. Es wurde gezeigt, dass Arrestin als Adapterprotein wirkt, das sowohl mit dem Clathrin-Adapter AP-2 als auch mit Clathrin selbst interagiert, was zur Internalisierung einiger Arrestin-gebundener Rezeptoren über Clathrin-beschichtete Pits führt (10, 11).

Es wurde auch vorgeschlagen, dass Arrestin die Rate der Resensibilisierung und Reexpression von Rezeptoren basierend auf der Rate seiner Dissoziation vom internalisierten Rezeptor bestimmt (12, 13). Eine der neueren Beobachtungen von Arrestin war jedoch die Entdeckung, dass Arrestine als Gerüstproteine ​​in einigen MAP-Kinase-Kaskaden fungieren, insbesondere in Kaskaden, die zur JNK3- und ERK2-Aktivierung führen (14–17). Diese Studien haben die Rolle von Arrestin im Rezeptor erhöht Signalübertragung von einem desensibilisierenden Mittel zu einem aktiven und vielseitigen Teilnehmer an der Signaltransduktion.
Trotz der Bedeutung von Arrestin-GPCR-Wechselwirkungen ist wenig über die Rezeptordomänen und Mechanismen bekannt, die an der Arrestinbindung beteiligt sind. Mutageneseexperimente haben Arrestinregionen definiert, die an der Erkennung des Phosphorylierungsstatus sowie des Aktivierungsstatus (d. h. ob ein Ligand gebunden ist oder nicht) des Rezeptors beteiligt sind (6, 8, 18, 19). Der Austausch von Carboxyl-terminalen Domänen zwischen GPCRs hat auch gezeigt, dass das Muster der Rezeptor-Phosphorylierung in dieser Domäne die Raten der Rezeptor-Internalisierung und -Recycling/Resensibilisierung beeinflussen kann (13). Wir haben die Mechanismen der Rezeptoraktivierung, Desensibilisierung und Internalisierung unter Verwendung des Nformyl-Peptid-Rezeptors (FPR), eines Mitglieds der Rezeptorfamilie der Chemolockstoffe/Chemokine, untersucht (20, 21). Unsere Ergebnisse haben gezeigt, dass die Rezeptorphosphorylierung entscheidend für die Arrestinbindung ist (22, 23), ebenso wie das Vorhandensein des hochkonservierten „DRY“-Motivs (24). Arrestin-Wechselwirkungen mit dem FPR sind jedoch für die FPR-Internalisierung oder die Verhinderung der G-Protein-Bindung nicht erforderlich, da wir kürzlich gezeigt haben, dass die Rezeptorphosphorylierung allein ausreichen kann, um G-Protein-Wechselwirkungen in Abwesenheit von Arrestin zu blockieren (22, 23). Diese Ergebnisse legen nahe, dass die primäre Rolle von Arrestin in bestimmten GPCR-Systemen tatsächlich darin bestehen könnte, als Adapter und Gerüst zu fungieren.
In dieser Studie untersuchten wir die Wechselwirkungen zwischen Mitgliedern der Arrestin-Familie mit der phosphorylierten carboxylterminalen Domäne des FPR unter Verwendung eines Bead-basierten, zellfreien Assays. Es wurden biotinylierte Peptide synthetisiert, die die 47 Reste des FPR-Carboxylterminus sowohl phosphoryliert als auch unphosphoryliert darstellen Zustand und an Streptavidin-beschichtete Polystyrolkügelchen gebunden, die dann mit Fluorescein-konjugierten Arrestinen inkubiert und durch Durchflusszytometrie analysiert wurden, um die Arrestinbindung zu bestimmen. Wir fanden heraus, dass Arrestine Carboxyl-terminale Peptide in einer phosphorylierungsabhängigen Weise banden.
Verkürzte Arrestine, die normalerweise intakte Rezeptoren in a binden phosphorylierungsunabhängig, auch nur phosphorylierte Peptide an Beads gebunden.

Phosphothreonine antibody (biotin)

60R-PR002bt Fitzgerald 100 ug 750 EUR

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

abx448368-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

GWB-19B769 GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

abx448368-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

abx448368-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (Biotin)

abx448368-96tests Abbexa 96 tests 612.5 EUR

Phosphothreonine Antibody: Biotin

MBS805022-04mL MyBiosource 0.4mL 575 EUR

Phosphothreonine Antibody: Biotin

MBS805022-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2050 EUR

Phosphothreonine antibody (biotin)

MBS534229-01mg MyBiosource 0.1mg 1155 EUR

Phosphothreonine antibody (biotin)

MBS534229-5x01mg MyBiosource 5x0.1mg 5040 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9: Biotin

SMC-158D-BI Stressmarq 0.1ml 343 EUR

Anti- Phosphothreonine -BIOTIN Antibody

GWB-699858 GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Phosphothreonine (Biotin)

MBS6258285-01mL MyBiosource 0.1mL 1055 EUR

Phosphothreonine (Biotin)

MBS6258285-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 4585 EUR

Phosphothreonine Proline (Biotin)

MBS6493346-01mL MyBiosource 0.1mL 955 EUR

Phosphothreonine Proline (Biotin)

MBS6493346-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 4140 EUR

Rabbit Anti Phosphothreonine Polyclonal Antibody,Biotin

DPBT-68215RP Creative Diagnostics 50 µg 1057.2 EUR

Phosphothreonine antibody

20C-CR1334RP Fitzgerald 100 ug 95 EUR

Phosphothreonine Antibody

abx448440-400ul Abbexa 400 ul 644.4 EUR

Phosphothreonine antibody

70R-PR006 Fitzgerald 100 ug 95 EUR

Phosphothreonine Antibody

GWB-3A06B5 GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Phosphothreonine Antibody

R20193-100UG NSJ Bioreagents 100ug 390.15 EUR

Phosphothreonine Antibody

abx448440-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody

abx448440-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody

abx448440-96tests Abbexa 96 tests 562.5 EUR

Phosphothreonine Antibody

MBS805510-04mL MyBiosource 0.4mL 525 EUR

Phosphothreonine Antibody

MBS805510-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 1830 EUR

Phosphothreonine Antibody

MBS474538-01mL MyBiosource 0.1mL 370 EUR

Phosphothreonine Antibody

MBS474538-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 1505 EUR

Phosphothreonine antibody

MBS534668-01mg MyBiosource 0.1mg 205 EUR

Phosphothreonine antibody

MBS534668-5x01mg MyBiosource 5x0.1mg 785 EUR

Phosphothreonine antibody

MBS536220-01mg MyBiosource 0.1mg 200 EUR

Phosphothreonine antibody

MBS536220-5x01mg MyBiosource 5x0.1mg 740 EUR

Phosphothreonine Antibody (APC)

abx448360-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (RPE)

abx448402-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (HRP)

abx448441-400ul Abbexa 400 ul 727.2 EUR

Phosphothreonine Antibody (HRP)

GWB-F11FAA GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Phosphothreonine Antibody: HRP

MBS806657-04mL MyBiosource 0.4mL 590 EUR

Phosphothreonine Antibody: HRP

MBS806657-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2120 EUR

Phosphothreonine Antibody: RPE

MBS805718-04mL MyBiosource 0.4mL 575 EUR

Phosphothreonine Antibody: RPE

MBS805718-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2055 EUR

Anti- Phosphothreonine Antibody

GWB-57FE70 GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Phosphothreonine Antibody (FITC)

abx448374-400ul Abbexa 400 ul 693.6 EUR

Phosphothreonine Antibody (FITC)

abx448374-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (FITC)

abx448374-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (FITC)

abx448374-96tests Abbexa 96 tests 612.5 EUR

Phosphothreonine Antibody: FITC

MBS805368-04mL MyBiosource 0.4mL 570 EUR

Phosphothreonine Antibody: FITC

MBS805368-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2030 EUR

Phosphothreonine Antibody (PerCP)

abx448394-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody: PerCP

MBS805891-04mL MyBiosource 0.4mL 580 EUR

Phosphothreonine Antibody: PerCP

MBS805891-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2065 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO390)

abx448288-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO390)

abx448288-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO390)

abx448288-96tests Abbexa 96 tests 625 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO488)

abx448296-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO488)

abx448296-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO488)

abx448296-96tests Abbexa 96 tests 625 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO594)

abx448312-1096tests Abbexa 10 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO594)

abx448312-596tests Abbexa 5 × 96 tests Ask for price

Phosphothreonine Antibody (ATTO594)

abx448312-96tests Abbexa 96 tests 625 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 390)

abx448288-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 488)

abx448296-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 565)

abx448304-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 594)

abx448312-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 633)

abx448320-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 655)

abx448328-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 680)

abx448336-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (ATTO 700)

abx448344-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 390

MBS805131-04mL MyBiosource 0.4mL 580 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 390

MBS805131-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2075 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 594

MBS805856-04mL MyBiosource 0.4mL 580 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 594

MBS805856-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2070 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 488

MBS806162-04mL MyBiosource 0.4mL 580 EUR

Phosphothreonine Antibody: ATTO 488

MBS806162-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2070 EUR

Phosphothreonine Antibody (Streptavidin)

abx448410-400ul Abbexa 400 ul 710.4 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9

SMC-158D Stressmarq 0.1ml 295 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-152F Stressmarq 0.4ml 501.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A565 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A633 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A655 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A680 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-A700 Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-ALP Stressmarq 0.4ml 483.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-APC Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-APCCY7 Stressmarq 0.4ml 576 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY350 Stressmarq 0.4ml 507.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY405 Stressmarq 0.4ml 493.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY488 Stressmarq 0.4ml 482.4 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY594 Stressmarq 0.4ml 484.8 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-DY633 Stressmarq 0.4ml 478.8 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-P594 Stressmarq 0.4ml 498 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-PCP Stressmarq 0.4ml 489.6 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-RPE Stressmarq 0.4ml 487.2 EUR

Antibody for Phosphothreonine

SPC-154F-STR Stressmarq 0.4ml 488.4 EUR

Phosphothreonine Antibody (PE / ATTO 594)

abx448386-400ul Abbexa 400 ul 727.2 EUR

Phosphoserine and Phosphothreonine antibody

70R-10686 Fitzgerald 1 ml 368 EUR

Phosphoserine and Phosphothreonine antibody

MBS837765-1mL MyBiosource 1mL 630 EUR

Phosphoserine and Phosphothreonine antibody

MBS837765-5x1mL MyBiosource 5x1mL 2690 EUR

Phosphothreonine-Pro antibody

20R-PR017 Fitzgerald 100 ug 95 EUR

Phosphothreonine-Pro antibody

MBS535083-01mg MyBiosource 0.1mg 205 EUR

Phosphothreonine-Pro antibody

MBS535083-5x01mg MyBiosource 5x0.1mg 785 EUR

Phosphothreonine Antibody (Alkaline Phosphatase)

abx448352-400ul Abbexa 400 ul 693.6 EUR

Phosphothreonine Antibody: Alkaline Phosphatase

MBS806273-04mL MyBiosource 0.4mL 575 EUR

Phosphothreonine Antibody: Alkaline Phosphatase

MBS806273-5x04mL MyBiosource 5x0.4mL 2040 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9: FITC

SMC-158D-FITC Stressmarq 0.1ml 339 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9: ATTO 390

SMC-158D-A390 Stressmarq 0.1ml 349 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9: ATTO 488

SMC-158D-A488 Stressmarq 0.1ml 348 EUR

Phosphothreonine Antibody, Clone 18F9: ATTO 594

SMC-158D-A594 Stressmarq 0.1ml 348 EUR

Phosphothreonine

PC-498 Kamiya Biomedical Company Polyclonal Ask for price

Phosphothreonine

AS18-4171 Agrisera AB 400 µl 377 EUR

Phosphothreonine

MBS6508127-005mg MyBiosource 0.05mg 800 EUR

Phosphothreonine

MBS6508127-5x005mg MyBiosource 5x0.05mg 3450 EUR

Phosphothreonine

MBS6508128-01mL MyBiosource 0.1mL 985 EUR

Phosphothreonine

MBS6508128-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 4270 EUR

Phosphothreonine

MBS8535137-01mL MyBiosource 0.1mL 345 EUR

Phosphothreonine

MBS8535137-01mLAF405L MyBiosource 0.1mL(AF405L) 565 EUR

Phosphothreonine

MBS8535137-01mLAF405S MyBiosource 0.1mL(AF405S) 565 EUR

Phosphothreonine

MBS8535137-01mLAF610 MyBiosource 0.1mL(AF610) 565 EUR

Phosphothreonine

MBS8535137-01mLAF635 MyBiosource 0.1mL(AF635) 565 EUR

Anti- Phosphothreonine-PROLINE Antibody

GWB-2AF90F GenWay Biotech 0.05 mg Ask for price

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A565 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A633 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A655 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A680 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-A700 Stressmarq 0.1ml 441.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-ALP Stressmarq 0.1ml 434.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-APC Stressmarq 0.1ml 440.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-APCCY7 Stressmarq 0.1ml 528 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-DY350 Stressmarq 0.1ml 459.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-DY405 Stressmarq 0.1ml 445.2 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-DY488 Stressmarq 0.1ml 433.2 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-DY594 Stressmarq 0.1ml 435.6 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-DY633 Stressmarq 0.1ml 430.8 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-HRP Stressmarq 0.1ml 428.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-P594 Stressmarq 0.1ml 450 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-PCP Stressmarq 0.1ml 440.4 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-RPE Stressmarq 0.1ml 438 EUR

Monoclonal antibody for Phosphothreonine

SMC-158D-STR Stressmarq 0.1ml 439.2 EUR

Phosphothreonine monoclonal antibody (1E11)

MBS566309-01mg MyBiosource 0.1mg 740 EUR

Phosphothreonine monoclonal antibody (1E11)

MBS566309-5x01mg MyBiosource 5x0.1mg 3295 EUR

Phosphothreonine (AP)

MBS6257868-01mL MyBiosource 0.1mL 1055 EUR

Phosphothreonine (AP)

MBS6257868-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 4585 EUR

Phosphothreonine (APC)

MBS6258077-01mL MyBiosource 0.1mL 1055 EUR

Phosphothreonine (APC)

MBS6258077-5x01mL MyBiosource 5x0.1mL 4585 EUR

Zusätzlich Direktbindung u Kompetitionsassays zeigen, dass verkürzte Arrestine binden
das phosphorylierte carboxylterminale Peptid mit signifikant höherer Affinität als Arrestine voller Länge. Im Vergleich mit phosphorylierungsunabhängigen Varianten von Arrestin in voller Länge zeigen unsere Ergebnisse eine wichtige Rolle für die carboxyterminale Domäne von Arrestin bei der Kontrolle der Affinität von Bindungswechselwirkungen mit phosphorylierten Rezeptordomänen.

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